使用同位素內標提高定量準確性
隨著質譜技術的發(fā)展,質譜技術的應用領域也越來越廣。由于質譜分析具有靈敏度高，樣品用量少，分析速度快，分離和鑒定同時進行等優(yōu)點，因此，質譜技術廣泛的應用于化學，化工，環(huán)境，能源，醫(yī)藥，運動醫(yī)學，刑事科學技術，生命科學，材料科學等各個領域。
在質譜分析中，同位素內標法是以穩(wěn)定同位素標記化合物作為內標，利用待測物與內標的響應豐度比值(峰面積比)進行線性回歸，通過對同位素豐度的準確質譜測量和對加入的內標準確稱量，做到對待測物的定量測定。該技術不需要對待測物進行定量分離、能有效消除基質干擾、檢測靈敏度高等優(yōu)點，已在食品、環(huán)境、臨床、藥物等分析領域中得到廣泛應用。
我們先看下同位素內標是如何消除基質效應的？
首先我們來看下電噴霧電離(ESI)的原理
01第一步，溶液在噴霧毛細管形成自由的帶電霧滴。
02第二步，通過溶劑蒸發(fā)和霧滴分裂使帶電霧滴變小，這一過程反復進行，直至生成很小的帶電霧滴。
03第三步，當靜電排斥力大于引力時，很小的帶電霧滴釋放出分析物離子。
很明顯地，如果有任何干擾物質影響了分析物在液滴表面的離子化過程或者形成了競爭，那么就會影響檢測結果的精密度和準確度，這種就是基質效應。也有人認為基質效應是由于干擾物和分析物共洗脫所致。這些干擾物隨樣品的不同而不同，比如有鹽、脂肪、表面活性劑和其他極性物質等。
基質效應不能通過傳統(tǒng)的內標來消除，這是因為傳統(tǒng)的內標和分析物因為樣品基質不同，導致分析物和內標的檢測結果大不相同，增加了檢測結果的不確定性。
但是可以通過在樣品中加入同位素內標法來消除基質效應，同位素內標和分析物結構相似，因此和分析物在樣品基質中的表現(xiàn)一樣。因此在多分析物檢測時，為每個分析物挑選合適的同位素內標可以確保檢測結果的準確性。
那么在檢測中，我們應該如何挑選同位素內標？
1應盡量選擇同位素豐度>98%以上的標準品。
2因為氘代產(chǎn)品容易和液相流動相溶劑中的活潑氫發(fā)生交換, 為了提高質譜檢測的靈敏度和準確率，建議液相盡量選擇非氘代的同位素標記產(chǎn)品，如13C，15N等。
3如果選擇氘代產(chǎn)品作為內標，需選擇質量差大于3(D3以上)的產(chǎn)品。
4同位素取代的位置也非常重要，根據(jù)檢測方法選擇合適的同位素
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